北京时间5月29日晚上，MotoGP意大利站在穆杰罗赛道结束了周五全部赛事的争夺。在压轴进行的决定10个直通Q2赛事资格的MotoGP组别练习赛里，主场作战的迪詹南托尼奥延续加泰站的良好状态，他做出了本节练习赛的最快圈并就此包揽了周五两节练习赛第一名的位置。杜卡迪阵营也同步反弹，他们有5辆赛车占据前10名的位置，这其中也包括本周伤愈复出的马奎兹。雅马哈阵营的林斯以及本田阵营的新秀车手莫雷拉也拿到直通Q2的门票，他们则与另外六辆赛车成绩不佳的日本厂商赛车形成了鲜明对比。而加泰站的杆位得主阿科斯塔今日表现不佳，他仅仅位列练习赛第13位，落入了明天Q1赛事的争夺。
三个组别的赛事继续在当日上午率先展开了一练的争夺。虽然穆杰罗赛道在周四夜间到周五清晨出现了降雨天气，但进入Moto2组别的赛事时赛道已经几乎完全变干，因此降雨并没有过多地影响MotoGP组别赛事的进行。在MotoGP组别的一练里，迪詹南托尼奥最后时刻使用全新的中性胎跑出1分46秒242的成绩并在这节比赛先下一城拿到头名。马丁、小椋蓝、维涅埃列斯以及米勒分别位列2到5位，完成复出首秀的马奎兹则排在第15位。他也在一练之后再次通过了医疗检查并被允许参与本周末余下的赛事。
在一练当中巴尼亚亚曾在1号弯因为刹车过晚冲进了沙石缓冲区，而他在试图返回赛道的途中因丢失重心险些导致自己摔在缓冲区当中，但赛车最终因此熄火。这在一定程度上影响了巴尼亚亚一练的测试进程。同样于1号弯有过跑大经历的还有Pramac车队的米勒。
当地时间下午15点，1个小时的练习赛赛事正式起表。巴尼亚亚上来之后率先做出1分45秒697的标杆成绩占据榜首的位置，而排在他身后的是只落后0.005秒的雅马哈厂队车手林斯。两位车手都久违地在练习赛刚开始的阶段很快地进入了出色的竞技状态。此时绝大多数车手使用的是前中后软轮胎登场，而贝塞奇、阿德圭尔、劳尔·费尔南德斯、小椋蓝、维涅埃列斯以及夸塔拉罗则使用前中后中轮胎进行测试。
倒计时还有30多分钟的时候，小椋蓝和贝塞奇早早地率先一套全新的前中后软轮胎提升进行刷圈工作。贝塞奇直接将赛道上的最快圈提升超过0.6秒到1分45秒024，小椋蓝也升至了第2位的位置。但就在他们提升成绩之后不久赛道上就因为红旗出动而暂时导致比赛中止，因为夸塔拉罗在4号弯遭遇了一次摔车，他的赛车在沙石区翻滚之后严重受损并且最终横在了赛道路面上。赛会为了安全考虑出动了红旗，夸塔拉罗本人并无大碍。